Применение криоконсервации при лечении бесплодия

Плюсы и минусы

Криоконсервация эмбрионов «про запас» позволяет паре повысить шансы на успешность ЭКО. Если в одном протоколе забеременеть не получилось, можно сделать второй. После ЭКО с наитивными (только полученными, свежими) эмбрионами протокол с криоэмбрионами очень часто дает быстрый положительный результат.

Если первое ЭКО не увенчалось успехом (а это довольно вероятный исход событий), при подготовке ко второму протоколу не понадобится агрессивная гормональная женщины, а значит, вредное воздействие на ее организм будет сведено к минимуму.

Наличие в криобанке замороженных эмбрионов значительно удешевляет последующие попытки ЭКО для супругов. А кроме того, дает им возможность воспользоваться правом переноса их в матку матери даже через несколько лет. Замороженные эмбрионы можно использовать для , если биологической маме по ряду причин противопоказано вынашивание беременности или у нее нет такой возможности (возраст старше 45 лет, отсутствие матки, тотальные дистрофические изменения репродуктивной системы, перенесенные онкологические заболевания).

Семейная пара, у которой ЭКО в одной из попыток увенчается успехом, имеют право сами решать судьбу оставшихся в заморозке эмбрионов, чьими биологическими родителями они являются. Они могут оплатить их хранение на несколько лет вперед, отдать их в качестве донорских другим бесплодным парам, а также разрешить науке воспользоваться ими для изучения и опытов или позволить их утилизацию.

С этого момента начинаются минусы. Решение об утилизации эмбрионов дается многим парам непросто. Некоторые религии (например, православие) считают это великим грехом — детоубийством, абортом.

Если есть большая вероятность патологий развития эмбрионов, лучше согласиться на процедуру криоконсервации и проводить оплодотворение размороженных ооцитов каждый раз перед подсадкой. Но в финансовом выражении это стоит значительно дороже.

Гибель замороженных эмбрионов в процессе разморозки — тоже явный минус криопротокола. Может получиться так, что из трех размороженных эмбрионов выживет только один или вообще ни одного, и тогда подсадку придется перенести на более поздние сроки.

Процесс сбора образцов и алгоритм замораживания

Перед сбором спермы рекомендуется максимально увеличить половое воздержание в течение не менее 2 дней, но не более 5 дней, чтобы максимально повысить качество образца для криоконсервации.

Образец будет собираться в стерильный контейнер путем мастурбации. Сбор может происходить дома при условии, что для доставки образца в банк спермы не требуется более 1 часа. В противном случае образцы могут быть собраны в специальных индивидуальных комнатах в клинике. Пациента в обязательном порядке обследуют на наличие инфекционных и иных заболеваний. После исследования пациенту позвонят и скажут, подходят ли его образцы для криоконсервации или нет.

Образец спермы будет разделен на один или несколько флаконов в зависимости от количества подвижной спермы в исходном образце. Каждый флакон используется для одной попытки искусственного оплодотворения. Однако некоторые врачи любят использовать два флакона для оплодотворения или даже выполнять две процедуры оплодотворения за цикл. Никто не может заранее предсказать, сколько флаконов требуется для достижения беременности. Обычно рекомендуют хранить не менее 12 флаконов (3-6 образцов). Эти флаконы можно также использовать в передовых методах репродукции, таких как ЭКО.

Алгоритм замораживания выполняется следующим образом:

1. Каждый образец (эякулят) смешивают со специальной средой или раствором, чтобы обеспечить защиту во время замораживания и оттаивания.
2. Образцы помещают в специальные пластиковые флаконы, которые кодируют и тщательно замораживают в жидком паре азота.
3. После замораживания флаконы погружают в жидкий азот в защитные емкости при температуре -196°C (-371°F).
4. Жидкий азот не зависит от источника энергии и регулярно проверяется и пополняется.
5. Каждому пациенту присваивается уникальный «криокод», образец спермы обрабатывается индивидуально с использованием постоянно маркированных флаконов лицензированными и сертифицированными учеными из клинических лабораторий.

Что важно знать о криопротоколе

Перед осуществлением подсадки замороженных зародышей, необходимо исключить одну из причин неудачных попыток ЭКО называемую условно «трудной трансплантацией». Если в других протоколах возникали травмы шейки матки, проблемы с цервикальным каналом (загибы или стенозы), наблюдались выделения сразу же после внедрения, то перед подсадкой криоконсервированных зародышей рекомендовано произвести пробный перенос.

Пробная трансплантация — имитация всей процедуры от начала до конца, но без реального переноса эмбрионов. Он позволит произвести оценку возможностей организма, установит степень проходимости цервикального канала. С помощью пробного переноса можно наметить дальнейший план действий: как произвести трансфер (с использованием наркоза или без), узнать, как поведет себя организм во время процедуры.

Во многих клиниках пробную подсадку проводят в день проведения реального трансфера. Если все проходит успешно, то для удачного ЭКО остается лишь перенести зародыш в матку.

Преимущества криоконсервации:

• Предотвращает гибель жизнеспособных зародышей;
• В случае неудачи в других протоколах не нужно повторно проводить гормоны и стимулировать работу яичников. Организм не получит большую дозу препаратов.
• Процедура дешевле, чем стандартное ЭКО, поскольку многие этапы пропускаются (гормонотерапия, пункция).
• Если произошли отклонения от протокола, эмбрионы можно повторно заморозить до наступления удачного момента.

Крипротокол является успешным этапом в развитии эмбриологии. Однако не всегда зародыши оживают после криоконсервации. Примерно в 5%-10% случаев после разморозки они оказываются не способны развиваться дальше. Репродуктолог должен оценить состояние эмбрионов. Разумеется, предпочтение отдают зародышам без повреждений, однако, после криоконсервации таких остается очень мало. Это происходит и потому, что обычно в других протоколах подсаживают эмбрионы лучшего качества.

Криоконсервация эмбрионов плюсы и минусы

В клиниках Москвы регулярно используется метод криоконсервации биологического материала, который заключается в замораживании половых клеток и эмбрионов для сохранения жизненных способностей и биологических свойств на неопределенный период.

Заморозка и хранение клеток осуществляется в жидком азоте при температуре в -196 ⁰С, при которой полностью останавливаются биохимические процессы и деление в клетках.

Перед осуществлением процедуры специалисты России рекомендуют оценить все плюсы и минусы заморозки эмбрионов.

Ключевые преимущества криоконсервации

Криоконсервация половых клеток и зародышей открывает перед парами, которые не могут родить детей, и пациентами с диагнозом бесплодия существенные медицинские перспективы для достижения желаемой беременности.

Использование методов заморозки рекомендуется в случае участия в программах суррогатного материнства, при выполнении циклов ЭКО, а также для снижения рисков возникновения патологических состояний в процессах зачатия.

Заморозка является новым и эффективным методом в клиниках ВРТ, поэтому многолетний опыт репродуктивной медицины позволяет отметить следующие плюсы заморозки яйцеклеток и эмбрионов:

• Перспектива сохранить жизнеспособные и здоровые половые клетки и эмбрионы, а также использовать их в дальнейшем для проведения различных процедур ВРТ;
• Высокий уровень гарантии зачать, выносить и родить здоровое потомство женщинам, вышедшим из репродуктивного возраста;
• Перспектива передачи донорского материала бесплодным парам;
• Возможность осуществления лабораторного контроля качества биологического материала, благодаря чему исключается риск развития патологий и хромосомных нарушений;
• Высокие шансы достижения беременности для женщин с онкологическими заболеваниями уже после прохождения процедур лучевой и химиотерапии;
• Существенное снижение количества медикаментозных стимуляций наступления овуляции, отсутствие необходимости выполнения чрезмерного количества операционного вмешательства в рамках пункции яичников;
• Предотвращение развития синдрома гиперстимуляции яичников.

Основные недостатки криоконсервации

Несмотря на наличие строгих правил и стандартов для проведения процедуры витрификации, существуют определенные минусы криоконсервации.В результате заморозки существует риск потери незначительной части яйцеклеток, сперматозоидов или эмбрионов в результате заморозки и размораживания.

• Потеря объема эмбрионов и половых клеток в момент выполнения технологических этапов витрификации;
• Отсутствие полной гарантии наступления зачатия и беременности, так как после замораживания здоровыми и живыми остаются незначительный процент зародышей;
• Объективные обстоятельства: криоконсервация предоставляет многим женщинам уверенность в том, что она сможет получить беременность в любой удобный момент. Однако по социальным и медицинским причинам бесплодие может стать существенной помехой, даже при условии наличия жизнеспособных ооцитов.

Несмотря на наличие объективных недостатков овосейвинга, процесс хранения эмбрионов не влияет на процесс развития зародыша. Успех в результате использования клеток после размораживания будет зависеть от множества факторов: возраст пациентки, соблюдение схемы медикаментозного лечения, количество используемых образцов, а также риски возникновения осложнений.

Жизнеспособность и здоровье эмбрионов, полученных в результате криоконсервации, не отличается от витальных свойств зародышей, зачатых естественным путем.

Варианты ЭКО с замороженной спермой

Внутриматочное осеменение (ВМО)

Внутриматочное осеменение (ВМО), как правило, рекомендуется, когда результаты анализа спермы в норме или очень близки к нормальным. С помощью данной терапии, подвижные сперматозоиды разделяются, концентрируются и внедряются непосредственно в матку. Это повышает шансы на беременность за счет увеличения числа прогрессивнодвижущихся сперматозоидов с хорошей морфологией, которые достигают яйцеклетки.

Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО)

Этот способ обычно рекомендуется при нормальной / слабой / умеренной форме мужского бесплодия. Сперму промывают, концентрируют и вводят непосредственно в яйцеклетки в лаборатории. Полученные в результате эмбрионы затем переносятся обратно в матку.

Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ)

ИКСИ как правило, применяется при наличии тяжелого фактора мужского бесплодия. Этот способ многократно увеличивает шансы оплодотворения, так как один сперматозоид вводится непосредственно в самый центр яйцеклетки.

Криоконсервация спермы

Сперматозоиды хорошо переносят заморозку и размораживание, поэтому их широко применяют в донорских программах. Перед криоконсервацией сперматозоидов мужчина проходит обследования, которые подтверждают ее качество. К данным исследованиям относятся:

• анализ крови на ВИЧ, сифилис, гепатиты В и С;
• анализ крови на цитомегаловирус;
• анализ отделяемого из уретры на микоплазму, уреаплазму, трепонему, хламидии;
• кариотипирование;

и другие исследования, полный перечень которых назначает лечащий врач.

Обязательно проводят спермограмму. Эякулят считается оптимальным для дальнейшего использования при следующих показателях:

• объем эякулята от 1 мл;
• концентрация сперматозоидов должна быть более 80 миллионов на мл;
• количество подвижных сперматозоидов в эякуляте более 60%;
• количество сперматозоидов без нарушения строения – от 60%.

Перед забором эякулята рекомендуется половое воздержание в течение 3-5 дней, не более. Забор спермоматериала проводится методом мастурбации с помещением эякулята в пластиковый контейнер. Рекомендуется осуществлять забор спермоматериала в репродуктивной клинике, поскольку он должен быть доставлен в лабораторию не позднее 3-х часов от момента забора с соблюдением правил транспортировки.

Криоконсервация и хранение спермы

Криобанк «Малыша» дает возможность сохранить  пациентам собственный биоматериал в случаях, когда предстоит  лечение, которое может негативно отразиться на качестве спермы. Также представители опасных профессий (военные, спасатели, пожарные и т.д.) сегодня имеют возможность сохранить сперму для своей семьи, подписав соответствующую документацию, в которой будет регламентировано, каким образом родственники могут распорядиться материалом, например, при несчастном случае.

Если сперматозоидов в сперме пациентов недостаточно или были неудачные попытки ЭКО, криобанк позволяет собрать необходимое количество спермы заранее, чтобы на момент подсадки материала было достаточно.

Виды криоконсервации

Криоконсервация позволяет сохранять яйцеклетки, эмбрионы и сперму для последующего применения в программах лечения бесплодия. Замороженный материал может быть неповрежденным годами, благодаря чему криотехнология приобретает множество возможностей.

Самым эффективным и щадящим способом криоконсервации эмбрионов и половых клеток остается сверхбыстрое замораживание. Такая процедура получила название витрификация. Этот способ позволяет избежать основной опасности замораживания — формирования кристаллов льда, ведь они могут нанести повреждение клетке во время оттаивания.

Криоконсервация эмбрионов

При проведении манипуляции оплодотворения можно получить большее количество эмбрионов, чем нужно для одной подсадки. Тогда по желанию пары их сохраняют. После инкубации в особых средах «насыщенный» криопротекторами эмбрион располагают на носитель. Его мгновенно погружают в жидкий азот. На носителе расположены основные данные клиента. В холодных условиях эмбрион может много лет ждать пробуждения.

Как только наступит необходимое время, эмбрион размораживают. Для этих целей его обрабатывают специальным раствором с носителя и опять окунают в растворы. Это позволит криопротекторам уступить место воде. Таким образом, получается готовый эмбрион, который уже готов к переносу.

Инновационные криотехнологии обладает повышенной эффективность — более 95% всех эмбрионов успешно подвергаются размножению. Частота наступления долгожданной беременности при переносе обработанных эмбрионов не уступает и даже превосходит такие же показатели свежих подсадок.

Криоконсервация яйцеклеток

Витрификация может быть задействована в целях сохранения яйцеклеток – ооцитов

При этом важно понимать, что женские клетки чувствительно реагируют на процесс замораживания. Таким образом, эффективность криоконсервации ооцитов ниже, по сравнению с результатами замораживания эмбрионов. Рассматриваемая манипуляция проводится в следующих случаях:

Рассматриваемая манипуляция проводится в следующих случаях:

1. Когда у женщины была диагностирована функциональная недостаточность или надобность удаления яичников (чтобы в дальнейшем успешно родить биологического малыша);
2. Если женщине диагностировали онкологическое заболевание. Перед выполнением химиотерапии и лучевой терапии проводят криконсервацию, так как указанные раннее методы терапии приведут к утрате качества репродуктивных клеток;
3. Когда женщина желает отсрочить момент наступления беременности, при этом не потерять репродуктивный потенциал.

Криоконсервация спермы

Эта процедура остается одной из самых важных составляющих дополнительных репродуктивных технологий. Сперматозоиды отличаются высокой выносливостью и отлично переносят заморозку и разморозку. Благодаря этому удается смело задействовать размороженную сперму для оплодотворения.

Криоконсервация спермы проводят при следующих условиях:

1. Когда мужчине предстоит сложная терапия или когда он работает на вредном производстве.
2. Когда партнер не в состоянии физически находиться в клинике на момент проведения ЭКО или стать «запасным вариантом», если результаты спермограммы не соответствуют требованиям.

Криоконсервация не оказывает пагубного влияния на здоровье будущего ребенка, но есть вероятность, что холодное время года станет его любимой порой.

Когда применяется криоконсервация

Криоконсервацией может воспользоваться любой человек, желающий сохранить свой генетический материал на будущее.

Криоконсервация спермы необходима, если:

• В день пункции яичников (изъятия яйцеклеток) мужчина не может сдать сперму.
• Плохие показатели спермограммы. В этом случае криоконсервация позволяет несколькими порциями получить нужное количество спермы.
• Имеется онкологическое заболевание, требующее химио- и лучевой терапии, поскольку такое лечение негативно влияет на репродуктивную функцию.
• Имеется заболевание, ухудшающее репродуктивные способности мужчины.

Показания к криоконсервации яйцеклеток:

• Для сохранения яйцеклеток с целью проведения ЭКО в будущем.
• Сохранение яйцеклеток с целью донорства.
• Онкологическое заболевание, требующее химио- и лучевой терапии, поскольку такое лечение негативно влияет на репродуктивную функцию женщины.

Криоконсервация яйцеклеток показана:

• Для проведения повторных попыток ЭКО в случае неудачи или если пара желает в будущем обзавестись еще детьми.
• При синдроме гиперстимуляции яичников. В этом случае шанс на успешное наступление беременности в этом цикле крайне невелик, а здоровье женщины находится под угрозой. Поэтому эмбрионы замораживают и сохраняют, а женщине дают возможность восстановиться и позже завершить ЭКО.
• Когда эндометрий оказался не готов к переносу эмбриона.
• Когда требуется NGS (Next Generation Sequencing) — генетическая диагностика эмбриона.

Как замораживаются эмбрионы?

Криоконсервации эмбрионов происходит под воздействием очень низких температур. Для этого используется жидкий азот, который достигает  -196° C. При такой температуре прекращается любая биологическая активность, но при этом они сохраняют свою физиологию. Однако в ходе замораживания могут формироваться кристаллы льда, которые ведут к повреждению клетки. Чтобы предотвратить это и сохранить образцы на неопределенный срок, используются криопротекторы — это вещества, которые действуют таким же образом, как и антифриз. Эти эмбрионы идентифицируются с помощью кода и хранятся в замороженном состоянии в резервуарах с азотом, отмечая их расположение для облегчения их местоположения.

В клинике InstitutoBernabeu эмбрионы каждого пациента хранятся в специальных отдельных баках криоконсервации. Благодаря этому методу, при котором баки не используются для совместного хранения эмбрионов или образцов других пациентов, эмбрионы пациента защищены от возможной контаминации или повреждений.

Когда нужна криоконсервация эмбрионов

К сожалению, далеко не каждая попытка забеременеть методом ЭКО бывает успешной. По статистике, в среднем беременность наступает и положительно развивается лишь в 30-65% случаев. В случае неудачи женщина вынуждена снова пройти через повторную процедуру стимуляции яичников и пункции фолликулов, которая сопровождается активной гормональной терапией.

Своеобразной страховкой пациентки на случай неудачи может служить замораживание в жидком азоте эмбрионов. Первый ребенок из замороженного эмбриона человека был рожден в 1984 г. в Голландии.

Доказано, что перенос свежих и размороженных оплодотворенных яйцеклеток имеет практически равные шансы на наступление беременности. Конечно, не каждый эмбрион благополучно «переживет» этапы заморозки и разморозки.

Часть эмбрионов (до 30%) разрушается, но оставшаяся часть – это эмбрионы высшего качества, которые могут быть успешно использованы для повторной подсадки. При этом криопротокол, в который включено хранение, разморозка и подсадка – гораздо дешевле, чем новая попытка ЭКО.

И, что немаловажно, криопротокол избавляет от необходимости проведения повторной стимуляции суперовуляции, а значит – снимает чрезмерную медикаментозную нагрузку на женский организм. Криопротокол также рекомендуется пациентам с повышенным риском развития синдрома гиперстимуляции яичников, тяжелые формы которого приводят к серьезным осложнениям вплоть до угрозы жизни. Криопротокол также рекомендуется пациентам с повышенным риском развития синдрома гиперстимуляции яичников, тяжелые формы которого приводят к серьезным осложнениям вплоть до угрозы жизни

Криопротокол также рекомендуется пациентам с повышенным риском развития синдрома гиперстимуляции яичников, тяжелые формы которого приводят к серьезным осложнениям вплоть до угрозы жизни.

Кроме того, в случае наступления беременности в свежем протоколе и благополучного рождения здорового ребенка, семейная пара имеет возможность через какое-то время прийти за вторым и последующим ребенком. У криоконсервированных эмбрионов не существует «срока годности» в общепринятом смысле.

Время хранения определяет пациент, оплачивая нахождение эмбриона в криобанке заранее

Очень важно помнить, что по завершению оплаченного срока хранения эмбриона пациент должен принять решение о его судьбе. Среди возможных вариантов – продление срока хранения, перенос эмбриона в матку, его утилизация либо же передача эмбриона для донации супружеской паре или для научных исследований. Шансы на наступление беременности при переносе размороженного эмбриона – такие же, как и при подсадке свежего

Шансы на наступление беременности при переносе размороженного эмбриона – такие же, как и при подсадке свежего.

Так как для криоконсервации выбирают только эмбрионы хорошего качества и в процессе размораживания выживают «сильнейшие»– шанс забеременеть даже увеличивается.

В нашей клинике используется метод витрификации эмбрионов, который по данным литературы демонстрирует высокий процент успешной беременности – аналогичный стандартному протоколу ЭКО.

Самый частый вопрос, волнующий родителей — а какой ребенок разовьется из криоконсервированного эмбриона? Не будет ли он иметь каких-либо отклонений в развитии? А некоторые семейные пары категорически отказываются от криоконсервации, говоря — не нужны нам эти «замороженные» дети… На этот счет можно сказать только то, что по данным различных исследований дети, рожденные из размороженных эмбрионов, страдают патологиями не чаще детей, рожденных путем естественного зачатия.

Криоконсервация эмбрионов — выдающееся научное достижение в области вспомогательных репродуктивных технологий, которое открывает двери в мир практически неограниченных возможностей зачатия.

Как происходит криоконсервация

Для криоконсервации используют очень низкие температуры. Стандартом является —196 °C. Сосуды с генетическим материалом помещают в жидкий азот, который и обеспечивает данную температуру. Использовать более высокие температуры для хранения данного биологического материала нецелесообразно, поскольку они малоэффективны и не позволяют сохранить репродуктивную функцию.

Использование низких температур останавливает биологические процессы в клетках, в том числе и обмен веществ и энергией с окружающей внешней средой, что способствует их сохранению сколь угодно долго. Максимальный период хранения сказать точно нельзя. Зафиксирован случай использования спермы, которая находилась в заморозке около 20 лет, при этом не утратив своих биологических функций.

Замороженный генетический материал хранится в специальных контейнерах, которые называются сосуды Дьюара. Для криоконсервации эмбрионов используют специальные соломинки, где они хранятся по одному или в паре. Спермоматериал хранят в микропробирках.